[問題] 關於RT-PCR 電泳圖的問題?

看板Biotech作者 (丹丹)時間18年前 (2007/06/09 15:48), 編輯推噓9(9推 0噓 0→)
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附圖： http://www.wretch.cc/album/album.php?id=gwendiline&book=28 跑完RT後 電泳圖會呈現類似"陰陽海"的樣子 上面白 下面黑 特別是 沒有load sample的ware 也會出現這樣的情形 不知道有沒有人有經驗 知道這是怎麼一回事 先說一下 電泳槽都是正常 而且出現的情形是時好時壞.. 有時有 有時沒有~ buffer 也有換 EtBr 和agar也都搖得均勻 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.192.30
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EtBr本來就會往負極的地方移動
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06/09 18:25, , 2F
不過...為何其他的膠片不會這樣?@@ 跑出來都很漂亮..
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06/09 20:28, , 3F
是用real-time 跑RT嗎?
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06/10 10:50, , 4F
EtBr是加固定量嗎?我們是隨意加..加的多就比較明顯
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不是real time喔 是一般PCR 另外EtBr濃度固定0.5μg/ml
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EtBr加太多 試著原濃度的1/10
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06/10 19:43, , 7F
請問你是外染還內染？ 印象中好像外染比較會這樣耶
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06/11 13:11, , 8F
我是內染唷~直接加進稍冷的agar 均勻"有技巧"地mix
06/11 13:11, 8F
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06/12 08:27, , 9F
同意一樓的說法，而且內染比較會這樣，外染不會。
06/12 08:27, 9F
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