[問題] 蛋白質induction問題
最近在生產一個蛋白質時
使用的是 pCANTAB 5E 及 E.coli strain HB2151 來表現
但在 30度C 1mM IPTG 5hr induction後
都會發現在 main peak 下面還有較小分子量的蛋白質 ( 如 30kDa & 26kDa )
用了 western blot 去偵測後,發現它可以被偵測到
所以推測它可能也是我們的蛋白質,只是可能尾巴的部分不見了
但不能確定是被 degrade 或是 沒有translate完的蛋白
有人也有遇過這種狀況嗎?
如果以較低溫及較低濃度的IPTG,但較長的時間去induction
是否有可能改善呢?
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不知道這樣的想法對不對...希望指教,謝謝 ^^
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