[問題] site-specific mutagenesis by overlap extension
Site-specific mutagenesis by overlap extension
因為我是研究DELETION的
所以需要用到這個實驗
我看了PROTOCOL 但不了解POLYMERASE的比例
首先 PCRI 是用primer1&2
PCRII是用primer3&4
最後一次PCR 是用primer1&4
那我應該從PCRI&PCRII取多少比例的μｌ 來做最後一次的PCR呢
PROTOCOL也指出最後一次PCR POLYMERASE要調出比例
需要這麼做嗎 還是直接使用可以校正的POLYMERASE就好呢
希望各位大大幫忙 如有PROTOCOL 也希望可以給我
PS 我們指導教授說這個技術有點小難 不希望做完後 結果DELETION沒成功 就尷尬啦XD
我的MAIL為 u9112051@em91.ndhu.edu.tw
麻煩大家囉 感謝
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