[問題] 流式細胞儀的isotype

看板Biology作者 (青蛙)時間8年前 (2016/06/18 18:10), 編輯推噓2(203)
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【問題】: 想請問一下流式細胞儀是不是不同樣品間 是不是該要重跑不同的isotype control ? 【問題起因】: 最近在跟教授討論檢測完的數據處理跟怎麼報告 教授認為我計算surface marker表現量的方法是有問題的 他認為isotype會切掉同一個區間後的比例 所以我應該在表上畫一條直線來確定我isotype control是一致的 這樣的話 positive marker的表現量應該會比我框的範圍高很多 【個人看法】: 不過我覺得因為我的實驗是屬於使用過濾方法來進行細胞純化 每批樣品來源已經是不同實驗體了 過濾後的樣品還會分為三個部分 再怎麼說isotype control的表現結果也不應該會長一樣 所以我每個樣品都會跑一次isotype control 更不用說是直接像老師說的 用同一條線去畫分出不同樣品測試後的surface marker表現量 (像是 | | cont. |__|_ | | \ 樣品A |__|__\___ | | | | ____ cont. | |-/ | -| 樣品B |__|______ 這樣一條線切下來全切同一區塊 marker 所以想請問一下 我這樣的想法有沒有問題 ? 如果沒有問題的話有沒人能幫忙給個建議讓我比較容易去說服老師 ? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.240.43.160 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biology/M.1466244629.A.7FF.html

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isotype是看樣品與抗體非專一性結合背景 若樣品不同
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理應染一組ISOTYPE 而不是一組通用 那要以哪組為主?
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比如說有些細胞刺激前後背景值就不一樣
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真正要分析時要以實驗條件下的ISOTYPE作為判斷陰陽標準
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目前 flow的isotype我只相信 DAKO&BD 這兩個品牌~
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