[問題] 關於IPTG誘導的問題

看板Biology作者 (樂樂)時間10年前 (2013/10/31 00:15), 編輯推噓3(303)
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【問題】: 需IPTG誘導才會表現某基因的質體,送入GM1 (F+) strains後, 為什麼不用IPTG誘導也會表現該基因? 【問題起因】: 把plasmid pIN-III-ompA2當作載體,接上目標蛋白的基因, 然後把這的質體送入GM1 (F+) strains中。 理論上,這個質體要經IPTG誘導,目標蛋白才會表現, 可是送入GM1 (F+) strains後,不用誘導也會產生表現。 【個人看法】: 1.GM1帶有什麼突變(像是lac I突變),所以才讓這個質體不用誘導也表現。 2.單純就是Basal level expression而已。 以上,感謝各位解惑。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.161.64.44

10/31 02:11, , 1F
你可以做個control: 把pIN-III-ompA2放到其他普通的F-
10/31 02:11, 1F

10/31 02:12, , 2F
菌株看看表現,這樣可以知道 basal level 有多高
10/31 02:12, 2F

11/01 07:25, , 3F
可以看看GM1(F+)的genotype是否沒有LacI, 所以總是打開
11/01 07:25, 3F

11/01 20:52, , 4F
做basal level的control嗎?好 我會試試......
11/01 20:52, 4F

11/01 20:55, , 5F
其實我對GM1不是很了解,我有試著去查genotype,但沒結果
11/01 20:55, 5F

12/13 20:46, , 6F
因為沒有repressor的存在吧?
12/13 20:46, 6F
文章代碼(AID): #1ISJ2N00 (Biology)