[問題] Tm and Annealing temperature

看板Biology作者 (我一個人住)時間14年前 (2009/12/18 14:35), 編輯推噓1(1推 0噓 1→)
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【問題】：PCR annealing temp 【問題起因】： 簡單的PCR，一般我都是看primer單子上Tm值-10 當成第一次aanealing temperature Tm - 5 當成第二次annaealing temperature 這次做的band卻微弱不清楚 Tag 用pfx(blunt ebd PCR) 因為要接進TOPO系統 所以Primer設計也有些變動 但我想應該不至於影響 我的問題是不知道有沒有人用別的方式計算annealing temperature 我想試試看怎麼樣算會比較好一點 【個人看法】： 還請大家提供一點意見了，謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.154.105
推
12/18 16:05, , 1F
AT 2 degree, GC 3 degree
12/18 16:05, 1F
→
12/19 08:30, , 2F
樓上的應該是AT2 GC4 不過這個公式有限制
12/19 08:30, 2F
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