[問題] mutant-enriched PCR 文章問題
【問題】：
http://clincancerres.aacrjournals.org/cgi/content/full/12/1/43
我看了這篇文章
有一個地方很不解
就是他Fig. 2跑Gel時確認時，本來WT的不是已經用限制酶切過了(配合Fig. 1)
應該是會斷成好幾個片段(應該是兩個)
為什麼到這邊就變原來的一段了呢~?
註:WT分別是A圖的138bp和B圖的130bp
還有另一個問題
這項實驗的原理是要加強突變基因的放大吧?
跑了2次PCR+限制酶的處理
如果限制酶有切開的那段(WT) 是不是第二次跑PCR的時候就不會放大了?
感謝
【問題起因】：
近期要報告EGFR的突變診斷方式
所以找到了這篇文章
【個人看法】：
是不是在做第二次PCR時 原本已切開的DNA又自己黏合回去了?
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